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超越BrdU,新一代细胞增殖成像分析试剂盒(EdU法)
发布时间:2019-06-06????????浏览次数:19????????返回列表

基于EdU掺入和后续的点击反应的EdU法?


常见的细胞增殖的方法主要包括:MTT法、WST-1法、CCK-8法,这些主要是基于检细胞活性,从而反映出总体的增殖效果,却无法检测到单个的增殖细胞。公认的最精确的检测细胞增殖的方法是直接检测细胞中DNA的合成,此前最常用的就是BrdU法,但是方法则需要DNA变性(如酸变性、热变性或者用DNase消化)去暴露BrdU,从而与BrdU抗体结合,整个实验影响因素较多,稳定性比较差。

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Abbkine针对这一应用难点,创新开发了基于EdU掺入和后续的点击反应的EdU法

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产品名称 货号 荧光特性
Cell Proliferation EdU Image Kit (Green Fluorescence) 细胞增殖成像分析试剂盒(EdU法)(绿色荧光) KTA2030 AbFluor 488 Ex/Em = 501/525 nm
Cell Proliferation EdU Image Kit (Orange Fluorescence) 细胞增殖成像分析试剂盒(EdU法)(橘红色荧光) KTA2031 AbFluor 545 Ex/Em = 546/565 nm

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原理:EdU(5-溴-2-脱氧尿嘧啶)试剂盒是一种嘧啶类似物,在DNA合成过程中替代胸苷掺入到新合成的DNA中另一方面,EdU上的乙炔基能与荧光标记的小分子叠氮化物探针(如AbFluor 488 azid,AbFluor 545 azide等)通过一价铜离子的催化发生共价反应,形成稳定的三唑环,该反应非常迅速,被称作点击反应(Click reaction)(30分钟完成)。

?点击反应 Click reactin

点击反应?Click?reactin

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试剂盒组分: 试剂盒优势:
??EdU (10mM) ? AbFluor 488和545?叠氮化物 ? 10×反应缓冲液 ? 含铜试剂 ? 还原剂?? ? 无须抗体。 ? 无变性步骤,保持细胞形态和DNA完整性。 ? 简单,可靠,省事的创新方法。 ? 专利的AbFluor 488和545 azide具有良好的光稳定性与抗淬灭性。 ? 针对荧光显微镜进行优化。

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结果展示:

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KTA2030成像 KTA2031成像
KTA2030成像:Hela细胞(绿色) KTA2031成像:Hela细胞(红色)

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说明书下载:

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    KTA2030(绿色):点击下载

    KTA2031(橘红色):点击下载

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保存建议:请参阅说明书中各个组件的存储条件,自发货之日起,按照推荐的保存条件,有效期为12个月。

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